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一文了解tNGS
2024-10-31
一、tNGS技術(shù)原理tNGS是一種基于超多重PCR擴(kuò)增（或靶向捕獲）與高通量測(cè)序兩種技術(shù)結(jié)合的新一代測(cè)序技術(shù)。它使用大量針對(duì)特定基因序列的引物/探針對(duì)待測(cè)樣品中抽提出的核酸進(jìn)行超多重PCR擴(kuò)增/探針捕獲，獲得大量目標(biāo)核酸片段，再對(duì)這些目標(biāo)核酸片段進(jìn)行高通量測(cè)序，然后對(duì)所得序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)樣本中的核酸進(jìn)行高靈敏以及高分辨率的識(shí)別。二、tNGS優(yōu)點(diǎn)1.針對(duì)性強(qiáng)：tNGS只針對(duì)特定基因序列進(jìn)行測(cè)序，因此可以大大減少測(cè)序數(shù)據(jù)量，提高檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性。2.高靈敏度...
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磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)是什么？
2024-10-30
磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)一：?自動(dòng)化、高通量?磁珠法核酸提取適合于自動(dòng)化處理，特別是在高通量實(shí)驗(yàn)室中，使用磁珠法核酸提取試劑配合自動(dòng)核酸提取純化儀可以快速完成大批量樣本的處理，提高工作效率?。?磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)二：?操作簡(jiǎn)便?磁珠法通過(guò)簡(jiǎn)單的震蕩混勻和磁力架磁分離步驟即可完成核酸的捕獲與純化，操作流程簡(jiǎn)化，相對(duì)于其他方法更為便捷?。?磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)三：?核酸回收率高?磁珠表面功能基團(tuán)豐富，與核酸的結(jié)合能力強(qiáng)，對(duì)核酸的回收率較高，尤其是對(duì)于微量樣本或低濃度核酸樣品，磁珠法...
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小鼠游離皮質(zhì)培養(yǎng)試劑盒怎么使用？
2024-10-28
買(mǎi)到了BrainBits小鼠游離皮質(zhì)培養(yǎng)試劑盒后，該如何使用呢？一、制劑（無(wú)菌罩室溫）：1.將80µl臺(tái)普蘭藍(lán)（SigmaT8154）加入0.5ml試管中進(jìn)行下面的步驟4。2.12mlNbActiv1™至室溫。3.將2ml分離的初級(jí)神經(jīng)元管置于30℃水浴中加熱1分鐘。二、細(xì)胞分散（無(wú)菌罩室溫）：1.用硅化巴斯德移液管，將整個(gè)試管的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到無(wú)菌15ml離心管中。2.旋轉(zhuǎn)1100rpm(200xG)，1分鐘。丟棄上清，留下約50µl含有微球...
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新生牛血清常用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基中
2024-10-28
新生牛血清常用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基中，為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖；可用于生物醫(yī)學(xué)研究中的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)等，為實(shí)驗(yàn)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì)；還可用于某些臨床診斷試劑的研發(fā)和生產(chǎn)，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒等。新生牛血清的存儲(chǔ)要求：1.儲(chǔ)存條件：應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C或更低的溫度下，避免反復(fù)凍融。同時(shí)，應(yīng)避免陽(yáng)光直射和高溫環(huán)境。2.開(kāi)封前檢查：在使用前，應(yīng)仔細(xì)檢查血清瓶是否有明顯的污染或變質(zhì)跡象，如渾濁、異味等。如果發(fā)現(xiàn)異常情...
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BrainBits培養(yǎng)基好不好？
2024-10-25
BrainBits培養(yǎng)基是一種無(wú)血清培養(yǎng)基，由Neurobasal、B27和Glutamax預(yù)混合而成，適用于神經(jīng)元的生長(zhǎng)和培養(yǎng)。?BrainBits培養(yǎng)基（NbActiv1）由Neurobasal、B27和Glutamax預(yù)混合而成，這些成分的組合優(yōu)化了神經(jīng)元的生長(zhǎng)條件。它特別適用于4天后的神經(jīng)元存活，并且簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，減少了污染的風(fēng)險(xiǎn)?。一、BrainBits培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn)?無(wú)血清培養(yǎng)?：BrainBits培養(yǎng)基是一種無(wú)血清培養(yǎng)基，避免了血清批次間差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高...
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全蛋白的提取方法和注意事項(xiàng)
2024-10-25
一、全蛋白的提取方法主要包括以下幾種?。全蛋白的提取方法一：?細(xì)胞準(zhǔn)備和清洗?：首先，準(zhǔn)備近乎長(zhǎng)滿的細(xì)胞，例如10cm大皿中的細(xì)胞。使用預(yù)冷的PBS清洗細(xì)胞1-2次，并棄去PBS。全蛋白的提取方法二：?細(xì)胞裂解?：加入適量的裂解液，如RIPA裂解液（強(qiáng)），并加入PMSF以抑制蛋白酶活性。如果需要提取磷酸化蛋白，還需加入磷酸酶抑制劑。裂解液配好后，將細(xì)胞在4℃下裂解15分鐘。全蛋白的提取方法三：超聲破碎?：將裂解后的細(xì)胞用超聲波破碎儀處理1-2分鐘，功率保持在20-30%，保持...
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怎么提高PCR擴(kuò)增效率？
2024-10-24
在PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，提高PCR擴(kuò)增效率是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵，下面我們探究一下如何提高PCR擴(kuò)增效率~1.引物的設(shè)計(jì)引物的設(shè)計(jì)是PCR擴(kuò)增效率的關(guān)鍵。引物長(zhǎng)度應(yīng)在18-30堿基之間，通常為20nt。引物序列應(yīng)具有dute性，避免在非目的片段中存在。引物的GC含量應(yīng)在40-60%之間，避免過(guò)多的G+C導(dǎo)致非特異條帶?。2.?優(yōu)化反應(yīng)條件??增加循環(huán)數(shù)?：通過(guò)增加循環(huán)次數(shù)可以提高擴(kuò)增效率。?提純模板?：確保模板DNA的純度，去除雜質(zhì)和抑制劑。?使用高質(zhì)量的Taq酶?：選擇活性高、穩(wěn)定性...
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大小鼠采血具體操作
2024-10-24
1、尾尖采血這是常用且操作簡(jiǎn)便的方法之一。首先將小鼠固定并暴露其尾巴，通常將其浸泡在40-50℃的溫水中幾分鐘或用酒精棉球擦拭鼠尾，使血管充盈。然后用無(wú)菌手術(shù)刀快速剪去尾尖1-2mm，血液會(huì)自然流出。2、摘眼球采血用左手拇指、食指和中指抓取小鼠的頸部頭皮，小指和無(wú)名指固定尾巴。輕壓需要摘取的眼部皮膚，使眼球充血突出。用眼科剪剪去小鼠的胡須，防止血從胡須處留下引起溶血。用眼科彎鑷夾取眼球并快速摘取，并使血液從眼眶內(nèi)流入0.5mlEP管中。3、眼眶靜脈叢采血：此方法適用于多次重復(fù)...
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